Draize-Test - Draize test

Draize-Test
Zweck	Kosmetik testen (allergische/toxische Reaktion)

Der Draize-Test ist ein akuter Toxizitätstest, der 1944 von den Toxikologen der Food and Drug Administration (FDA) John H. Draize und Jacob M. Spines entwickelt wurde. Das Verfahren, das ursprünglich für die Prüfung von Kosmetika verwendet wurde, beinhaltet das Auftragen von 0,5 ml oder 0,5 g einer Prüfsubstanz auf das Auge oder die Haut eines zurückgehaltenen, bei Bewusstsein befindlichen Tieres und dann eine festgelegte Zeitdauer, bevor es ausgespült und die Wirkung aufgezeichnet wird. Die Tiere werden bis zu 14 Tage lang auf Anzeichen von Erythem und Ödem im Hauttest sowie auf Rötung, Schwellung, Ausfluss, Ulzeration, Blutung, Trübung oder Erblindung des getesteten Auges beobachtet. Die Testperson ist normalerweise ein Albino- Kaninchen, obwohl auch andere Arten verwendet werden, einschließlich Hunde . Die Tiere werden nach dem Test euthanasiert, wenn der Test irreversible Augen- oder Hautschäden verursacht. Tiere können zu Testzwecken wiederverwendet werden, wenn das getestete Produkt keine bleibenden Schäden verursacht. Tiere werden typischerweise nach einer "Auswaschzeit" wiederverwendet, während der alle Spuren des getesteten Produkts von der Teststelle verteilt werden dürfen.

Die Tests sind umstritten. Sie werden von Kritikern aufgrund der Unterschiede zwischen Kaninchen- und menschlichen Augen und der subjektiven Natur der visuellen Bewertungen als grausam und unwissenschaftlich angesehen. Die FDA unterstützt den Test und erklärt, dass "bis heute kein einzelner Test oder keine Testreihe von der wissenschaftlichen Gemeinschaft als Ersatz für den Draize-Test akzeptiert wurde ". Aufgrund seiner umstrittenen Natur ist die Anwendung des Draize-Tests in den USA und Europa in den letzten Jahren zurückgegangen und wird teilweise dahingehend modifiziert, dass Anästhetika verabreicht und niedrigere Dosen der Testsubstanzen verwendet werden. Chemikalien, die in vitro bereits schädliche Wirkungen haben, werden derzeit nicht in einem Draize-Test verwendet, wodurch die Anzahl und der Schweregrad der durchgeführten Tests reduziert werden.

Hintergrund

John Henry Draize (1900–1992) erwarb einen BSc in Chemie und dann einen Doktortitel in Pharmakologie, in dem er Hyperthyreose untersuchte . Anschließend ging er an die University of Wyoming und untersuchte Pflanzen, die für Rinder, andere Nutztiere und Menschen giftig sind. Die US-Armee rekrutierte Draize 1935, um die Auswirkungen von Senfgas und anderen chemischen Mitteln zu untersuchen.

1938 verabschiedete der US-Kongress nach einer Reihe von Berichten über Kohlenteer in Mascara, die zu Erblindung führten, den Federal Food, Drug, and Cosmetic Act , der Kosmetika unter behördliche Kontrolle stellte. Im folgenden Jahr trat Draize der FDA bei und wurde bald zum Leiter der Abteilung für Haut- und Augentoxizität befördert, wo er mit der Entwicklung von Methoden zum Testen der Nebenwirkungen von kosmetischen Produkten beauftragt war. Diese Arbeit gipfelte in einem Bericht von Draize, seinem Laborassistenten Geoffrey Woodard und dem Abteilungsleiter Herbert Calvery, in dem beschrieben wird, wie die akute, mittlere und chronische Exposition gegenüber Kosmetika durch Auftragen von Verbindungen auf Haut, Penis und Augen von Kaninchen beurteilt werden kann.

Nach diesem Bericht wurden die Techniken von der FDA verwendet, um die Sicherheit von Substanzen wie Insektiziden und Sonnenschutzmitteln zu bewerten, und später für das Screening vieler anderer Verbindungen übernommen. Als Draize 1963 in den Ruhestand ging, und obwohl er nie persönlich seinen Namen mit irgendeiner Technik verbunden hatte, waren Reizverfahren allgemein als "Draize-Test" bekannt. Um das Zielorgan zu unterscheiden, werden die Tests heute oft als "Draize-Sehtest" bezeichnet und "der Draize-Hauttest".

Verlässlichkeit

1971, vor der Einführung des modernen Draize-Protokolls im Jahr 1981, verteilten die Toxikologen Carrol Weil und Robert Scala von der Carnegie Mellon University drei Testsubstanzen zur vergleichenden Analyse an 24 verschiedene universitäre und staatliche Labors. Die Laboratorien lieferten für die gleichen Stoffe deutlich unterschiedliche Bewertungen von nicht reizend bis stark reizend. Eine Studie des US-amerikanischen Scientific Advisory Committee on Alternative Toxicological Methods aus dem Jahr 2004 analysierte den modernen Draize-Hauttest. Sie fanden heraus, dass Tests:

• Identifizieren Sie einen schwerwiegenden Reizstoff fälschlicherweise als sicher: 0-0,01%
• Identifizieren Sie einen leichten Reizstoff fälschlicherweise als sicher: 3,7%-5,5%
• Schwere Reizstoffe als schwache Reizstoffe falsch einschätzen: 10,3 % - 38,7 %

Beschreibungen des Tests

Anti-Testing

Nach Angaben der American National Anti-Vivisektion Society werden Lösungen von Produkten direkt in die Augen der Tiere aufgetragen, was zu "starkem Brennen, Juckreiz und Schmerzen" führen kann. An den Augenlidern der Kaninchen werden Clips angebracht, um sie während des Testzeitraums, der mehrere Tage dauern kann, offen zu halten. Die Chemikalien hinterlassen oft die Augen "ulzeriert und bluten". Beim Draize-Test auf Hautreizung werden die Prüfsubstanzen auf rasierte und angescheuerte Haut (mehrere Hautschichten werden mit Klebeband entfernt) aufgetragen und mit Plastikfolie abgedeckt.

Profi-Tests

Laut der British Research Defense Society ist der Draize-Augentest mittlerweile ein "sehr milder Test", bei dem geringe Mengen an Substanzen verwendet und beim ersten Anzeichen einer Reizung aus dem Auge ausgewaschen werden. In einem Brief an Nature , der geschrieben wurde, um einen Artikel zu widerlegen, der besagte, dass sich der Draize-Test seit den 1940er Jahren nicht wesentlich verändert habe, schrieb Andrew Huxley : ist nur zulässig, wenn bereits nachgewiesen wurde, dass die Substanz beim Auftragen auf die Haut keine Schmerzen verursacht, und es werden In-vitro -Vorscreening-Tests empfohlen, beispielsweise ein Test an einem isolierten und perfundierten Auge nur gegeben, wenn der Test an einem einzelnen Tier durchgeführt wurde und eine Zeitspanne von 24 Stunden verstrichen ist, bis die Verletzung offensichtlich wurde."

Unterschiede zwischen dem Kaninchenauge und dem menschlichen Auge

Kirk Wilhelmus, Professor an der Abteilung für Augenheilkunde am Baylor College of Medicine , führte 2001 eine umfassende Überprüfung des Draize-Augentests durch. Er berichtete auch, dass Unterschiede in Anatomie und Biochemie zwischen dem Kaninchen- und dem menschlichen Auge darauf hindeuten, dass das Testen von Substanzen an Kaninchen möglicherweise nicht die Auswirkungen auf den Menschen vorhersagen. Er stellte jedoch fest, "dass Augen von Kaninchen im Allgemeinen anfälliger für reizende Substanzen sind als die Augen von Menschen", was sie zu einem konservativen Modell des menschlichen Auges macht. Wilhelmus kam zu dem Schluss, dass "der Draize-Augentest ... mit Sicherheit Schaden für den Menschen verhindert hat", prognostiziert jedoch, dass er "verdrängt wird, wenn in vitro und klinische Alternativen zur Beurteilung der Reizung der Augenoberfläche auftauchen".

Alternativen

Für die öffentliche Gesundheit zuständige Industrie- und Aufsichtsbehörden bewerten aktiv tierversuchsfreie Tests, um die Anforderungen an Draize-Tests zu reduzieren. Vor 2009 hatte die Organisation für wirtschaftliche Zusammenarbeit und Entwicklung (OECD) keine alternativen Methoden zur Prüfung des Augen- oder Hautreizungspotenzials validiert. Seit dem Jahr 2000 hat die OECD jedoch alternative Tests für die Korrosivität validiert, was bedeutet, dass Säuren, Basen und andere ätzende Substanzen nicht mehr an Draize an Tieren getestet werden müssen. Die alternativen Tests umfassen ein Humanhaut-Äquivalentmodell und den transepikutanen Resistenztest (TER). Darüber hinaus ist die Verwendung der menschlichen Hornhautzelllinie (HCE-T-Zellen) eine weitere gute alternative Methode, um Augenreizungen auf potenzielle Chemikalien zu testen.

Im September 2009 hat die OECD zwei Alternativen zum Draize-Augentest validiert: den Rinder-Cornea-Trübungstest (BCOP) und den isolierten Hühneraugentest (ICE). Eine 1995 von der Europäischen Kommission und dem britischen Innenministerium finanzierte Studie bewertete diese unter neun möglichen Ersatzstoffen, darunter den Hühnerei- Chorioallantois-Membran (HET-CAM)-Test und ein Epithelmodell, das aus menschlichen Hornhautzellen kultiviert wurde, im Vergleich mit Draize-Testdaten. Die Studie ergab, dass sich keiner der alternativen Tests für sich allein als zuverlässiger Ersatz für den Tierversuch erwies, eine Post-hoc- Analyse der Daten ergab jedoch, dass bei bestimmten Testkombinationen eine „hervorragende Leistung“ beobachtet wurde.

Positive Ergebnisse einiger dieser Tests wurden von Aufsichtsbehörden wie der britischen Gesundheits- und Sicherheitsbehörde und dem US -Gesundheitsministerium ohne Tests an lebenden Tieren akzeptiert , aber negative Ergebnisse (keine Reizung) erforderten weitere In-vivo- Tests. Die Aufsichtsbehörden haben daher damit begonnen, eine abgestufte Teststrategie für Haut- und Augenreizungen einzuführen und Alternativen zu verwenden, um die Draize-Tests von Substanzen mit den schwerwiegendsten Auswirkungen zu reduzieren.

Vorschriften

Vereinigtes Königreich

In Großbritannien veröffentlicht das Innenministerium Leitlinien für Augenreizungstests mit dem Ziel, das Leiden der Tiere zu verringern. In seinen Richtlinien von 2006 wird das In-vitro- Screening aller Verbindungen vor Tierversuchen "nachdrücklich empfohlen" und die Verwendung validierter Alternativen, sofern verfügbar, vorgeschrieben. Sie verlangt, dass die „physikalischen und chemischen Eigenschaften der Testlösung nicht so beschaffen sind, dass eine schwerwiegende Nebenwirkung vorhergesagt werden könnte“; daher dürfen "bekannte ätzende Stoffe oder solche mit hohem Oxidations- oder Reduktionspotential nicht geprüft werden."

Das Testdesign sieht vor, dass die Substanz zunächst an einem Kaninchen getestet wird und die Wirkung der Substanz auf die Haut überprüft werden muss, bevor sie in das Auge eingebracht werden kann. Wenn ein Kaninchen Anzeichen von „starken Schmerzen“ oder Leiden zeigt, muss es sofort getötet, die Studie abgebrochen und der Wirkstoff nicht an anderen Tieren getestet werden. Bei Tests, bei denen eine schwere Augenreizung als wahrscheinlich angesehen wird, sollte eine Auswaschung eng nach der Prüfung im Auge des ersten Kaninchens erfolgen. Im Vereinigten Königreich bedarf jede Abweichung von diesen Richtlinien der vorherigen Zustimmung des Außenministers .

Siehe auch

• Tierversuche an Kaninchen
• LD _50- Test

Anmerkungen

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